所需试剂:
1.尿激酶标准品 2.牛纤维蛋白原 3.牛凝血酶 4.牛纤维蛋白溶酶原 5.三羟甲基氨基甲烷缓冲液 6.酪蛋白
测定方法的具体步骤:
1.标准溶液的制备:取尿激酶标准品,加巴比妥—氯化钠缓冲液(pH7.8),制成每1ml中含60单位的溶液。
2.标准曲线的绘制:取试管4支,各加牛纤维蛋白原溶液0.3ml,置37oC±0.5oC水浴中,分别加入巴比妥—氯化钠缓冲液(pH7.8)0.9ml、0.8ml、0.7ml、0.6ml,依次加标准品溶液0.1ml、0.2ml、0.3ml、0.4ml,再分别加混合溶液0.4ml,立即摇匀,分别计时。反应系统应在30~40秒内凝结,当凝块内小气泡上升到反应系统体积一半时作为反应终点,记时。以尿激酶浓度为横坐标,以反应终点时间与入水浴时间的差值为纵坐标,在双对数纸上绘制标准曲线,应呈直线。
3.供试品溶液的制备:取本品3支,分别按标示量用巴比妥—氯化钠缓冲液(pH7.8)溶解并稀释成与标准品溶液相同的浓度。
4.供试品的测定:按上法标准品的测定,在标准曲线上求得效价(单位),计算每1mg供试品的效价(单位)。
5.标准品和供试品各作两次,所得的直线亦应平行,否则应重复试验。